- 黄酮类化合物的分离
- 较常用的分离方法有：
（一）柱层析法
分离黄酮类化合物常用的吸附剂或载体有、聚酰胺及纤维素粉等。此外，也有用氧化铝、氧化镁及硅藻土等。
1.硅胶柱层析：
此法应用范围最广，主要适于分离异黄酮、二氢黄酮、二氢黄酮醇及高度甲基化（或乙酰化）的黄酮及黄酮醇类。少数情况下，在加水去活化后也可用于分离极性较大的化合物，如多羟基黄酮醇及其苷类等。
2. 聚酰胺柱层析：
对分离黄酮类化合物来说，聚酰胺是较为理想的吸附剂。其吸附强度主要取决于黄酮类化合物分子中羟基的数目与位置及溶剂与黄酮类化合物或与聚酰胺之间形成氢键缔合能力的大小。
聚酰胺柱层析可用于分离各种类型的黄酮类化合物，包括苷及苷元、查耳酮与二氢黄酮等
3.葡聚糖凝胶(Sephadex gel)柱层析：
对于黄酮类化合物的分离，主要用两种型号的凝胶：Sephadex-G型及Sephadex-LH-20型。
葡聚糖凝胶分离黄酮类化合物的机理是：
分离游离黄酮时，主要靠吸附作用。凝胶对黄酮类化合物的吸附程度取决于游离酚羟基的数目。但分离黄酮苷时，则分子筛的属性起主导作用。在洗脱时，黄酮苷类大体上是按分子量由大到小的顺序流出柱体。
分离游离黄酮主要是吸附作用，极性小到大顺序洗脱。
分离黄酮苷类，主要是分子筛作用，分子大到小顺序洗脱。
总的洗脱顺序：糖多的苷到糖少的苷到游离苷元（极性小到大）
葡聚糖凝胶柱层析中常用的洗脱剂有：
碱性水溶液（如0.1mol/L NH4OH），含盐水溶液(0.5mol/L NaCl等)。
醇及含水醇，如甲醇，甲醇-水（不同比例）、t-丁醇-甲醇(3:1)、乙醇等。
其它溶剂：如含水丙酮、甲醇-氯仿等。
二）梯度pH萃取法
梯度pH萃取法适合于酸性强弱不同的黄酮苷元的分离。根据黄酮类苷元酚羟基数目及位置不同其酸性强弱也不同的性质，可以将混合物溶于有机溶剂（如乙醚）后，依次用5%NaHCO3、5%Na2CO3、0.2% NaOH及4%NaOH水溶液萃取，来达到分离的目的。
酸性:7，4-二OH溶于5%NaHCO3液 ) 7-或4-OH （5%Na2CO3液） 一般OH（0.2%NaOH） 5-OH （4% NaOH液）
具黄酮类化合物与铅盐生成的沉淀，滤集后按常法悬浮在乙醇中，通入H2S进行复分解，滤除硫化铅沉淀，滤液中可得到黄酮类化合物。但初生态的PbS沉淀具有较高的吸附性，因此现多不主张用H2S脱铅，而用硫酸盐或磷酸盐，或用阳离子交换树脂脱铅。
有邻二酚羟基的黄酮可与硼酸络合，生成物易溶于水，可与不具上述结构的黄酮类化合物相互分离。